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滅鮭氣單胞菌PCR定量試劑盒陽(yáng)性對(duì)照反應(yīng)體系：

a）模板DNA：選用樣本純化的DNA。

b）引物的選擇：建議選擇該樣本較易擴(kuò)增的基因的引物，如 β-actin 基因或 GAPDH 等。

4.2 陰性對(duì)照

PCR反應(yīng)體系被污染會(huì)導(dǎo)致PCR結(jié)果出現(xiàn)假陽(yáng)性，需要設(shè)置陰性對(duì)照來(lái)排除。將使用的移液器槍頭浸泡在2× Blood Master Mix中，添加引物，ddH2O進(jìn)行PCR擴(kuò)增；另取ddH2O作為模板，用目的基因引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增，以排除PCR體系是否被污染和實(shí)驗(yàn)是否有其他污染源。

注意事項(xiàng)

. 盡量使用新鮮抗凝血。若凍存血，應(yīng)避免反復(fù)凍融。

2. 解凍后2× Blood Master Mix可能出現(xiàn)渾濁，冰上放置-2 min，待溶液澄清后，上下顛倒混勻，不影響試劑性能。

3. 電泳檢測(cè)時(shí)，切勿使用含有 SDS 的Loading Buffer，否則在電泳時(shí)會(huì)在泳道中出現(xiàn)一大團(tuán)拖尾亮帶，影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
4. 建議擴(kuò)增片段長(zhǎng)度 kb以?xún)?nèi)，以便擴(kuò)增效率*。

5. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。