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　　ELISA是指以酶作為標記物、以抗原和抗體之間免疫結合反應為基礎的固相吸附測定方法。因此，一個ELISA測定試劑，其有機組成部分包括：包被的抗原或抗體的固相支持物，即聚苯乙烯塑料微孔或試管；酶標記的抗體或抗原和酶的反應底物等。
 

　　抗原或抗體的固相化，并不影響其免疫結合活性，酶標記的抗體或抗原亦是如此，并且標記酶的活性不因標記過程而喪失。整個測定中，醫(yī)學|教育網(wǎng)搜集整理抗原與抗體的結合反應在固相支持物上進行，反應結果的判斷，以酶與其底物作用后的顯色或產(chǎn)生熒光或發(fā)光反應為標準，顯色或產(chǎn)生熒光或發(fā)光的強度，與臨床標本中待測物的濃度成正比或反比關系。目前國內(nèi)的ELISA試劑盒均以酶的顯色反應來完成測定。
 

　　Elisa試劑盒實驗反應時間注意事項：
 

　　、在備孔稀釋好待測樣品和標準品；
 

　　2、上板:應從后一孔上完板開始計時，以確保反應時間；
 

　　3、加底物：應從加一孔開始計時，以確保加終止液時的反應時間是5分鐘。
 

　　ELISA試劑盒注意事項：
 

　　、標本宜在新鮮時檢測。如有細菌污染，菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,也會產(chǎn)生假陽性反響。保存過久可發(fā)作聚合在ELISA中可使本底加深。
 

　　2、凍住標本溶解后，蛋白質局部濃縮，散布不均，應充分混勻宜輕緩，避免氣泡，可上下顛混合，不要在混勻器上激烈震蕩。
 

　　3、污濁或有沉積的標本應先離心或過濾，弄清后再檢測。
 

　　4、反復凍融會使蛋白效價下降，所以代測樣本如需保存作多次檢測，宜少量分裝冰存。