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小鼠前列環(huán)素(PGI2)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格

小鼠前列環(huán)素(PGI2)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格

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小鼠前列環(huán)素(PGI2)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格 詳細(xì)資料

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產(chǎn)品名稱:小鼠前列環(huán)素(PGI2)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格
英文名稱: PGI2 ELISA Kit
規(guī)格:96T/48T
存儲條件:2-8℃
有效期:6個月
特異性:本ELISA檢測試劑盒可同時檢測天然或重組的,且與其他相關(guān)蛋白無交叉反應(yīng)。
檢測種屬:人、大小鼠、兔、羊、猴、豬、豚鼠ELISA檢測試劑盒等種屬。
適用范圍:此試劑盒僅用于科研實驗,禁用于臨床 。

小鼠前列環(huán)素(PGI2)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格類型和操作步驟
ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。在這種測定方法中有3種必要的試劑:
①固相的抗原或抗體,
②酶標(biāo)記的抗原或抗體,
③酶作用的底物。根據(jù)試劑的來源和標(biāo)本的性狀以及檢測的具備條件,可設(shè)計出各種不同類型的檢測方法。
(一)雙抗體夾心法、
(二)一步法、
(三)間接法測抗體、
(四)競爭法。
小鼠前列環(huán)素(PGI2)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格標(biāo)本要求
.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能馬上進(jìn)行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟
.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可向客服索取說明書》》 在線索取
2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中 先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品0μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色5分鐘。
0. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后5分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
小鼠前列環(huán)素(PGI2)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格技術(shù)流程:
一、雙抗體夾心法(檢測未知抗原)
、用緩沖液將抗體稀釋至-0ug/ml。在反應(yīng)孔中加0.ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃ 孵育小時。然后洗滌(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。
3、加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~小時,洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分鐘。
5、終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強,陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則40nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.倍,即為陽性。
二、間接法(檢測未知抗體)
、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至-0ug/ml, 每孔加0.ml,4℃過夜。次日洗滌3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)
3、加酶標(biāo)抗體:于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.05ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分鐘。
5、終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強,陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則40nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.倍,即為陽性。

INHBB    重組人 Inhibin beta B / INHBB / Activin B 蛋白 (His 標(biāo)簽)    INHBB
GFPT    重組人 GFPT / GFAT 蛋白    GFPT
CDK2    重組人 CDK2 / p33 蛋白 (His 標(biāo)簽)    CDK2
PTK6    重組人 PTK6 / Brk 蛋白 (GST 標(biāo)簽)    PTK6
PARP    重組人 PARP- / PARP 蛋白 (His 標(biāo)簽)    PARP
MST4    重組人 MST4 蛋白 (GST 標(biāo)簽)    MST4
RAC    重組人 RAC / MIG5 蛋白 (GST 標(biāo)簽)    RAC
PBK    重組人 PDK / PDZ binding kinase / TOPK 蛋白 (His 標(biāo)簽)    PBK
AGO2    重組人 AGO2 / Argonaute 2 / EIF2C2 蛋白 (His 標(biāo)簽)    AGO2
TNK2    重組人 ACK / TNK2 蛋白 (GST 標(biāo)簽)    TNK2
MAPK9    重組人 JNK2 / MAPK9 蛋白 (His 標(biāo)簽)    MAPK9
TNFRSF0B    重組人 TRAIL R2 / CD262 / TNFRSF0B 蛋白 (His 標(biāo)簽)    TNFRSF0B
SERPING    重組人 SerpinG / C inhibitor / CIN 蛋白 (His 標(biāo)簽)    SERPING
SPARC    重組人 Osteonectin / SPARC 蛋白 (His 標(biāo)簽)    SPARC
CD40    重組人 CD40 / TNFRSF5 蛋白 (His 標(biāo)簽)    CD40
CD86    重組人 CD86 / B7-2 蛋白 (His 標(biāo)簽)    CD86
BIRC2    重組人 cIAP / HIAP2 蛋白 (AVI 標(biāo)簽)    核糖核酸酶 H    600U    
20892-200    大鼠內(nèi)皮細(xì)胞分離液 .066    200mL
6070-00    土壤 DNAout    00 次
Rosetta(DE3)pLysS 感受態(tài)細(xì)胞    0.mL×0    
潮 B    g    
液相內(nèi)毒素清除劑    00 次    
大鼠白細(xì)胞分離液 .084    200mL    
8-0240-3    蛋白去除試劑 S    3g 
3024-00    DNA  Tween 20    00mL
小鼠前列環(huán)素(PGI2)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格噻唑蘭    250mg    
DNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) (3)φX74 DNA/Hinc Ⅱ    50 次    
柱式糞便 DNAout    50 次    
XL-Blue 菌種    mL    
3235-200    Klenow 片段 (3´ → 5´ exo-)    200U
8040-50    柱式 OLIGO 回收試劑盒    50 次
羧芐青    g    
單細(xì)胞全基因組擴(kuò)增試劑盒    30 次    
一站式蛋白質(zhì)非變性 PAGE 套裝 ( 中 pH)    30 次    

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