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小鼠腦脊髓炎病毒(EV)抗體(IgG)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒保存標本要求
.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融。
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟
.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可向客服索取說明書》》 在線索取
2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中 先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品0μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色5分鐘。
0. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后5分鐘以內進行。
小鼠腦脊髓炎病毒(EV)抗體(IgG)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒保存保證產品質量,*,質量可靠,靈敏度高,效果穩(wěn)定。等優(yōu)點已經得到廣大客戶的認可,您可放心,且我司有專門的售后部門對您進行全線跟蹤。
產品名稱:小鼠腦脊髓炎病毒(EV)抗體(IgG)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒保存
英文名稱:Mouse encephalomyelitis virus(EV)antibody(IgG)ELISA kit
規(guī)格:96T/48T
存儲條件:2-8℃
有效期:6個月
特異性:本ELISA檢測試劑盒可同時檢測天然或重組的,且與其他相關蛋白無交叉反應。
檢測種屬:人、大小鼠、兔、羊、猴、豬、豚鼠ELISA檢測試劑盒等種屬。
適用范圍:此試劑盒僅用于科研實驗,禁用于臨床 。
小鼠腦脊髓炎病毒(EV)抗體(IgG)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒保存類型和操作步驟
ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。在這種測定方法中有3種必要的試劑:
①固相的抗原或抗體,
②酶標記的抗原或抗體,
③酶作用的底物。根據試劑的來源和標本的性狀以及檢測的具備條件,可設計出各種不同類型的檢測方法。
(一)雙抗體夾心法、
(二)一步法、
(三)間接法測抗體、
(四)競爭法。
小鼠腦脊髓炎病毒(EV)抗體(IgG)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒保存技術流程:
一、雙抗體夾心法(檢測未知抗原)
、用緩沖液將抗體稀釋至-0ug/ml。在反應孔中加0.ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內溶液,用洗滌緩沖液洗3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應孔中,置37℃ 孵育小時。然后洗滌(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。
3、加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~小時,洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分鐘。
5、終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則40nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.倍,即為陽性。
二、間接法(檢測未知抗體)
、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至-0ug/ml, 每孔加0.ml,4℃過夜。次日洗滌3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.05ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)
3、加酶標抗體:于反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.05ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分鐘。
5、終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則40nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.倍,即為陽性。
CHEK 重組小鼠 CHK / CHEK 蛋白 (His & GST 標簽) CHEK
IL6 重組小鼠 IL6 / Interleukin-6 蛋白 IL6
HGF 重組小鼠 HGF / Hepatocyte Growth Factor 蛋白 (His 標簽) HGF
CCL3 重組小鼠 CCL3 / Mipa 蛋白 CCL3
ESM 重組小鼠 ESM / Endocan 蛋白 (His 標簽) ESM
IL2B 重組小鼠 IL2B / IL-2B 蛋白 (His 標簽) IL2B
RSPO 重組小鼠 R-Spondin / RSPO 蛋白 (His 標簽) RSPO
CSFR 重組小鼠 CSFR / MCSF Receptor / CD5 蛋白 (His & Fc 標簽) CSFR
BTLA 重組小鼠 BTLA 蛋白 (Fc 標簽) BTLA
METRN 重組小鼠 Meteorin / METRN 蛋白 (Fc 標簽) METRN
IL27 重組小鼠 IL27 / Interleukin-27 蛋白 (His 標簽) IL27
SEMA5A 重組小鼠 Semaphorin 5A / SEMA5A 蛋白 (His 標簽) SEMA5A
FAM3D 重組小鼠 FAM3D / Oit 蛋白 (His 標簽) FAM3D
FIGF 重組小鼠 VEGF-D / VEGFD / FIGF 蛋白 (His 標簽) FIGF
F7 重組小鼠 Coagulation Factor VII / FVII / F7 蛋白 (His 標簽) F7
LAIR 重組小鼠 LAIR 蛋白 (Fc 標簽) LAIRdGTP 溶液,2.5mM 2mL
CAS528-50-7 纖維二糖 5g
40379-0 Rosetta 感受態(tài)細胞 0×00μL
小鼠中性粒細胞分離液 .00 200mL
海腎熒光素酶報告基因檢測試劑盒 00 次
苯甲基磺 g
甲基硫吡喃葡萄糖苷 (OTG) 5g
CAS9007-8-2 弗氏*佐劑 0mL
00884-2.5 IPTG 干粉 2.5g
一站式 Western 印跡套裝 (HRP 顯色法 ) 20 次
甲酰胺,PCR 5mL
25g
小鼠腦脊髓炎病毒(EV)抗體(IgG)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒保存Poly(I).Poly(C) 250mg
CAS60-24-2 β- 乙醇 00mL
3057-0 鈷柱介質 0mL
真菌種屬鑒定 PCR Mix 5 00 次
60405-0 RNase-free DTT 溶液 ,M 0mL
PCNA 小鼠單抗 00 μL
CM 交換介質 50mL
DNA 電泳分子量標準 (300-0000 bp) 50 次