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小鼠肺大動脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒說明書 | Mouse Lung PrimacellTM:NormalArtery Smooth Muscle Cells | 來電可享受優(yōu)惠 |
小鼠肺大動脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒【Mouse Lung PrimacellTM:NormalArtery Smooth Muscle Cells】
小鼠肺大動脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒說明書小鼠肺大動脈平滑肌細(xì)胞分離自正常小鼠肺動脈組織,細(xì)胞呈梭形或多角形。該細(xì)胞所表達的鈣通道表面表達的ICAM-和VCAM-,參與血管壁炎癥反應(yīng)。該細(xì)胞也是多數(shù)重要動脈疾病的靶細(xì)胞。 雖然肺大動脈組織機械韌性很強,但利用本公司試劑盒中提供的肺大動脈組織分離體系來分離,EDTA/EGTA處理過的薄的肺大動脈組織片能使得肺大動脈組織中成肺大動脈細(xì)胞的一些功能特性發(fā)生改變,從而將成肺大動脈細(xì)胞分離開來。
本試劑盒適用于分離培養(yǎng)新生兒或成年人的成肺大動脈細(xì)胞。本體系提供了佳的組織分離條件,分離單個細(xì)胞的效率是已出版文獻中所報道的5~6倍。此外,本體系還能保證所分離的細(xì)胞在培養(yǎng)基中具有很高的活性。利用的成纖維抑制體系,可以大程度地降低所培養(yǎng)的成肺大動脈原代細(xì)胞中成纖維細(xì)胞的含量。 小鼠肺大動脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒適合于培養(yǎng)肺大動脈組織細(xì)胞。本試劑盒包含: ()OptiTDSTM小鼠肺大動脈平滑肌細(xì)胞組織解離液(3×ml) (2)小鼠肺大動脈平滑肌細(xì)胞組織處理緩沖液(00ml) (3)FibrOutTM小鼠肺大動脈平滑肌細(xì)胞成纖維抑制劑(ml(500x)) (4)小鼠肺大動脈平滑肌組織洗液(5x00 ml) (5)小鼠肺大動脈平滑肌細(xì)胞生長因子(ml 500x)及血清(5x0ml) (6)小鼠肺大動脈平滑肌細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基(5 x00ml) (7)小鼠肺大動脈平滑肌組織預(yù)備液( x00 ml) (8)小鼠肺大動脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒使用說明書
培養(yǎng)步驟:
小鼠肺大動脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒說明書對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按:2到:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按:2到:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按:2到:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。?
赭綠青霉 Penicillium ochrochloronUM-UC-3, 人膀胱移行細(xì)胞
根瘤菌 Rhizobium sp.紅曲霉 Monascus anka
PATU8988(人胰腺細(xì)胞)人睪支持細(xì)胞*培養(yǎng)基
雙孢蘑菇 Agaricus bisporus鼠李糖桿菌 Lactobacillus rhamnosus
胰凝蛋白酶(含0mL酶解緩沖液)蘇云金芽孢桿菌 Bacillus thuringiensis
小鼠腸粘膜上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基SW 780(人膀胱移行細(xì)胞)
植物桿菌 Lactobacillus plantarum溝腸桿菌 Enterobacter cloacae
費氏中華根瘤菌 Sinorhizobium fredii異旋孢腔菌 Cochliobolus heterostrophus
mRTEC, 小鼠腎小管上皮細(xì)胞結(jié)腸
少根根霉 Rhizopus arrhizus人腦血管平滑肌細(xì)胞
小鼠肺大動脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒說明書3-氯-4-硝三氟甲分子式:225.55英文名稱:3- -4- nitro three:402--9分子量: C7H3ClF3NO2
6-溴-2-乙酰吡分子式:200.03英文名稱:6- -2- acetyl pyridine:49669-3-8分子量: C7H6BrNO
2-溴-5-氟甲分子式:89.02英文名稱:2- -5- fluoride:452-63-分子量: C7H6BrF
2--5-巰-,3,4-噻二唑分子式:33.2英文名稱:2- amino -5- -,3,4- two:2349-67-9分子量: C2H3N3S2
4,4''-二對三聯(lián)分子式:482.英文名稱:4,4''- two iodine to three:9053-4-6分子量: C8H2I2
3-(2,5-二甲氧)-H-吡唑分子式:英文名稱:3- (2,5- two) -H-:822-45-2分子量: CH2N2O2
梔子甙英文名稱:Gardenia分子式:388.37分子量:C7H24O0:2452-63-8
7-羥喹啉分子式:45.6英文名稱:7- hydroxy group:580-20-分子量: C9H7NO
2-巰-6-甲并惡唑分子式:65.2英文名稱:2- mercapto -6- methyl benzoxazole:22876-22-8分子量: C8H7NOS
,3,5-三(三氟甲)分子式:282.英文名稱:,3,5- three (three f) benzene:729-8-7分子量: C9H3F9
注意事項:
. 接收到小鼠肺大動脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒說明書,肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細(xì)胞00X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。
6.000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。