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大鼠冠狀動脈內皮細胞培養(yǎng)試劑盒【Rat Coronary PrimaCell: Normal Coronary Artery Endothelial Cells】
     大鼠冠狀動脈內皮細胞培養(yǎng)試劑盒說明書冠狀動脈是供給心臟血液的動脈，起于主動脈根部，分左右兩支，行于心臟表面。其中，大鼠冠狀動脈內皮細胞分離自正常大鼠冠狀動脈內皮細胞，呈單層扁平分布。內皮細胞或血管內皮是一薄層的專門上皮細胞，由一層扁平細胞所組成。它形成血管的內壁，是血管管腔內血液及其他血管壁（單層鱗狀上皮）的接口。內皮細胞是沿著整個循環(huán)系統(tǒng)，由心臟直至少的微血管。大鼠冠狀動脈內皮細胞傳3-5代仍可以保持原代細胞的分化狀態(tài)，進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調節(jié)特定基因的遺傳功能。 雖然冠狀動脈內皮組織機械韌性很強，但利用本公司試劑盒中提供的冠狀動脈內皮組織分離體系來分離，EDTA/EGTA處理過的冠狀動脈內皮組織能使得冠狀動脈內皮細胞一些功能特性發(fā)生改變，從而將冠狀動脈內皮細胞分離開來。

本試劑盒適用于分離培養(yǎng)大鼠冠狀動脈內皮細胞。本體系提供了佳的組織分離條件，分離單個細胞的效率是已出版文獻中所報道的5~6倍。此外，本體系還能保證所分離的細胞在培養(yǎng)基中具有很高的活性。利用的成纖維抑制體系，可以大程度地降低所培養(yǎng)的冠狀動脈內皮原代細胞中成纖維細胞的含量。 大鼠冠狀動脈內皮細胞培養(yǎng)試劑盒適合于培養(yǎng)大鼠的冠狀動脈內皮細胞。本試劑盒包含： （）OptiTDSTM大鼠冠狀動脈內皮細胞組織解離液（3×ml） （2）大鼠冠狀動脈內皮細胞組織處理緩沖液(00ml) （3）FibrOutTM大鼠冠狀動脈內皮細胞成纖維抑制劑(ml（500x）) （4）大鼠冠狀動脈內皮組織洗液(5 x 00 ml) （5）大鼠冠狀動脈內皮細胞生長因子（ml500x）及血清（5x0ml） （6）大鼠冠狀動脈內皮細胞基礎培養(yǎng)基(5 x 00ml) （7）大鼠冠狀動脈內皮組織預備液 ( x 00 ml) （8）大鼠冠狀動脈內皮細胞培養(yǎng)試劑盒使用說明書
培養(yǎng)步驟：
大鼠冠狀動脈內皮細胞培養(yǎng)試劑盒說明書對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按：2到：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。?

FLRT 抗體, 鼠單抗 ELISA    50 µg

Transferrin Receptor / TFRC / CD7 抗體 (PE), 鼠單抗 FCM    25 Test

CD9 抗體, 鼠單抗 FCM   IF   ICC/IF   50 µg

Prostatic Acid Phosphatase / ACPP 抗體, 兔單抗 ELISA    50 µg

KIAA00 / p5 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA   IHC-P    50 µg

IFNGR / CD9 / IFN-gamma-R 抗體, 兔單抗 ELISA   WB    50 µg

CFHR2 抗體, 兔單抗 ELISA    50 µg

K-Ras 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA    50 µg

G-CSFR / CD4 / CSF3R 抗體, 鼠單抗 IF   ICC/IF    50 µg

IFNB / IFN-beta / Interferon beta 抗體, 鼠單抗 ELISA    50 µL

大鼠冠狀動脈內皮細胞培養(yǎng)試劑盒說明書3,5-二硝-4-氯三氟甲分子式：270.55英文名稱：3,5- two nitro -4- three f：393-75-9分子量： C7H2ClF3N2O4

R(+)-5,5'-二氯-6,6'-雙(DIPHE.PHOS)2,2'-二甲氧聯(lián)分子式：65.5英文名稱：-5,5'(+) two (-6,6'-) 2,2' bis (DIPHE.PHOS) R two：8593-97-7分子量： C38H30Cl2O2P2

5-硝-,0-菲咯啉分子式：225.2英文名稱：5- nitro -,0-：499-88-6分子量： C2H7N3O2

3-(三氯甲)酚乙呋喃分子式：25.2英文名稱：3- (three) phenol ethyl：3399-73-3分子量： C8H5N

4,6-二甲氧-2-((氧羰)胺)嘧分子式：英文名稱：4,6- two (-2-), a group of oxygen radicals, ((carbonyl group)：分子量：

2-乙甲英文名稱：2- ethyl toluene分子式：20.2分子量： C9H2：6-4-3

藏紅T英文名稱：Hide red T分子式：350.85分子量： C20H9ClN4：477-73-6

鍵那綠英文名稱：Bond that green分子式：分子量：：

4-溴甲砜分子式：235.英文名稱：4- bromo methyl sulfone：3466-32-8分子量： C7H7BrO2S

黃連提取物英文名稱：Extract of Rhizoma分子式：分子量：：

注意事項：
. 接收到大鼠冠狀動脈內皮細胞培養(yǎng)試劑盒說明書，肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞00X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。