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大鼠腎上皮細胞培養(yǎng)試劑盒【Rat Kidney PrimaCell5: Normal Renal Artery Endothelial Cells】
     大鼠腎上皮細胞培養(yǎng)試劑盒培養(yǎng)腎是脊椎動物的一種器官，屬于泌尿系統(tǒng)的一部分，負責過濾血液中的雜質、維持體液和電解質的平衡，后產生尿液經由后續(xù)管道排出體外；同時也具備內分泌的功能以調節(jié)血壓。在人體中，正常成人具備兩枚腎臟，位于腰部兩側后方。其中，大鼠腎上皮細胞分離自正常大鼠腎組織，腎上皮細胞主要功能：（）腎小管上皮細胞重吸收原尿中幾乎全部的葡萄糖和氨基酸，并排泌非營養(yǎng)物質進入終尿。（2）細胞能分泌炎癥介質如細胞因子和趨化因子，通過產生IL-8或直接趨化白細胞參與急性炎癥反應。（3）是許多先天性疾病、代謝性疾病和炎癥的主要損傷部位。（4）在移植腎炎癥和新月體腎炎中上皮細胞表達IL-2R alpha和MHC-Ⅱ類抗原，參與腎免疫損傷的發(fā)生。大鼠腎上皮細胞傳5代以上仍可以保持原代細胞的分化狀態(tài)，進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調節(jié)特定基因的遺傳功能。 雖然大鼠腎上皮組織機械韌性很強，但利用本公司試劑盒中提供的腎上皮組織分離體系來分離，EDTA/EGTA處理過的薄的腎上皮組織片能使腎上皮細胞的一些功能特性發(fā)生改變，從而將腎上皮細胞分離開來。

本試劑盒適用于分離培養(yǎng)大鼠腎上皮細胞。本體系提供了佳的組織分離條件，分離單個細胞的效率是已出版文獻中所報道的5~6倍。此外，本體系還能保證所分離的細胞在培養(yǎng)基中具有很高的活性。利用的成纖維抑制體系，可以大程度地降低所培養(yǎng)的腎上皮原代細胞中成纖維細胞的含量。 大鼠腎上皮細胞培養(yǎng)試劑盒適合于培養(yǎng)大鼠的腎上皮細胞。本試劑盒包含： （）OptiTDSTM大鼠腎上皮細胞組織解離液(3×ml) （2）大鼠腎上皮細胞組織處理緩沖液(00ml) （3）FibrOutTM大鼠腎上皮細胞成纖維抑制劑 (ml（500x）) （4）大鼠腎上皮組織洗液(5 x 00 ml) （5）大鼠腎上皮細胞生長因子（ml500x）及血清（5x0ml） （6）大鼠腎上皮細胞基礎培養(yǎng)基(5 x 00ml) （7）大鼠腎上皮組織預備液 ( x 00 ml) （8）大鼠腎上皮細胞培養(yǎng)試劑盒使用說明書
培養(yǎng)步驟：
大鼠腎上皮細胞培養(yǎng)試劑盒培養(yǎng)對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數換液方式，棄去半數培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按：2到：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。?

CD66 / ALCAM 抗體, 鼠單抗 ELISA    50 µg

CD55 / DAF 抗體 (PerCP), 兔單抗 FCM    25 Test

VASN / Vasorin 抗體, 兔多抗 ELISA    400 µg

Dkk3 / REIC 抗體, 兔多抗 ELISA    400 µg

CEACAM6 / CD66c 抗體 (PE), 鼠單抗 FCM    25 Test

PLAUR / CD87 抗體, 鼠單抗 FCM    50 µg

CD3 / Nectin-3 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA    50 µg

Arylsulfatase A / ARSA 抗體, 兔單抗 ELISA    50 µg

IL-2 抗體, 兔多抗 ELISA    400 µg

GPA33 抗體, 兔多抗 ELISA    400 µg

大鼠腎上皮細胞培養(yǎng)試劑盒培養(yǎng)絡塞維英文名稱：Luo Seville分子式：428.43032分子量：C20H28O0：84954-92-7

2-氯-4-吡分子式：239.44英文名稱：2- chloride -4-：53034-86-7分子量： C5H3ClIN

,5-二羥異喹啉分子式：6.6英文名稱：,5- two hydroxy ISO：88540分子量： C9H7NO2

五氘代氯分子式：7.6英文名稱：Five deuterium substituted：34-55-4分子量： C6ClD5

刺五加苷D英文名稱：Thorn D分子式：742.72分子量：C34H46O8：79484-75-6

叔戊分子式：48.24英文名稱：Tert amylbenzene：2049-95-8分子量： CH6

,2,4-*氧分子式：68.9英文名稱：,2,4- grade three：35-77-3分子量： C9H2O3

,3-二氯-2-丙英文名稱：,3- two -2-分子式：28.98分子量： C3H6Cl2O：96-23-

2-氯-3-硝吡分子式：58.54英文名稱：2- -3- nitro pyridine：5470-8-8分子量： C5H3ClN2O2

-溴-3,5-二甲氧分子式：27.06英文名稱：- two -3,5-：20469-65-2分子量： C8H9BrO2

注意事項：
. 接收到大鼠腎上皮細胞培養(yǎng)試劑盒培養(yǎng)，肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞00X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。