NCI-H2227 (人小細胞肺癌細胞)

商品屬性

商品介紹

別稱 H2227; H-2227

年齡（性別） 男；54歲

組織來源 肺

生長特性 半貼半懸

細胞形態(tài) 上皮細胞樣

參考資料(來源文獻)

生物安全等級 1

生長培養(yǎng)基 DMEM/F12＋5μg/ml Insulin＋0.01mg/ml Transferrin＋30nM Sodium Selenite＋10nM Hydrocortisone＋10nM β-estradiol＋2mM L-glutamine＋5% FBS＋1% P/S

推薦傳代比例 1:2-1:4

推薦換液頻率 2~3次/周

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

細胞處理：

1） 凍存細胞的復蘇：

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，培養(yǎng)基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。

2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加入0.25％（w / v）-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細胞可以適當延長消化時間），然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。

3.輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細胞的生長活力，后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進行。

3）細胞凍存: 收到細胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細胞種子以備后續(xù)實驗使用。

細胞傳代培養(yǎng)操作步驟：

（1）當顯微鏡下細胞形態(tài)和生長密度達到90%時，進行傳代。

（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。

（3）加入覆蓋瓶底量的且含有EDTA。

（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細胞脫落，加入2倍量的中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。

（5）細胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細胞，吹打細胞使其均勻分散。

（7）吸棄細胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間。

（9）細胞凍存

公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠膜聯(lián)蛋白A2(ANXA2)檢測試劑盒 ，英文名： ANXA2 ELISA Kit

Mouse insulin ELISA Kit (INS) 小鼠胰島素(INS)檢測試劑盒

RatangiotensionⅠ,Ang-ⅠELISAKit 大鼠血管緊張素Ⅰ(Ang-Ⅰ)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforGFAP(Mouseglialfibrillaryacidicprotein)ELISAKit小鼠神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白

細胞甘油二脂酰激酶(DAGKINASE)酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒20次

RatsolubleClusterofdiffereiation86,sCD86ELISAKit大鼠可溶性CD86(B7-2/sCD86)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

HA重組甲型流感 H3N2 (A/Aichi/2/1968) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein

Sema3F (semaphorin 3F 0.5mgSema3F (semaphorin 3F) 臂板蛋白3F抗原

METAP1D重組人 MAP1D / Methionine Aminopeptidase 1D 蛋白 Protein

EVI2A Protein Human 重組人 EVI2A 蛋白 (Fc 標簽)

IL2RA Protein Human 重組人 IL2Ra / CD25 蛋白 (Fc 標簽)

Sema3F (semaphorin 3F 0.5mgSema3F (semaphorin 3F) 臂板蛋白3F抗原

EVI2A Protein Human 重組人 EVI2A 蛋白 (Fc 標簽)

HA重組甲型流感 H3N2 (A/Aichi/2/1968) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein

IL2RA Protein Human 重組人 IL2Ra / CD25 蛋白 (Fc 標簽)

METAP1D重組人 MAP1D / Methionine Aminopeptidase 1D 蛋白 Protein

NCI-H2227 (人小細胞肺癌細胞)小鼠呼腸孤病毒3型抗體(RV-3 Ab)檢測試劑盒 96T/48T

Rat phosphotylinosital 3 kinase (PI3K) ELISA Kit 大鼠0酸肌醇3激酶(PI3K)檢測試劑盒

humanAzidothymidine,AZTELISAKit 人(AZT)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humanai-myelinassociatedglycoproteinaibody,MAGAb檢測試劑盒人抗髓鞘相關(guān)糖蛋白抗體(MAGAb)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物染色質(zhì)免疫沉淀分析(CHIP)試劑盒10次

HumanUreaplasmaurealyticumaibody,UU-AbELISAKit人解脲脲原體抗體(UU-Ab)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠γ基(GABA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠5羥色胺(5-HT)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠P物質(zhì)受體(SP-R)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠P物質(zhì)(SP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

細胞接收后的處理：

1）收到細胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請拍照后及時聯(lián)系我們。

2）請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài)，同時給剛收到的細胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時收到時細胞狀態(tài)的依據(jù)。

3）貼壁細胞：細胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL，放到細胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細胞生長密度達70%-80%以上，可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中，若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。