L Wnt-3A (小鼠皮下結(jié)締組織細胞)

本公司所有產(chǎn)品僅供科學(xué)實驗，不做其他科學(xué)實驗外的使用！

商品詳情：

別稱 L-Wnt-3A; L-Wnt3A; LWnt3A; LWnt-3A

種屬 小鼠

年齡（性別） 雄性，100日齡

組織來源 組織：皮下結(jié)締組織；疏松結(jié)締組織及脂肪；品系：C3H/An

生長特性 貼壁細胞

細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

背景描述：L Wnt-3A細胞是由L-M(TK-)細胞用Wnt-3A表達載體轉(zhuǎn)染并在含G418的培養(yǎng)基中篩選出的穩(wěn)轉(zhuǎn)株。Wnt-3A基因編碼一個有變異的信號功效分泌性糖蛋白，Wnt基因控制胚胎發(fā)過程中的許多模式形成和生長事件。L Wnt-3A細胞分泌有生物活性的Wnt-3A蛋白，L Wnt-3A細胞是目前生產(chǎn)Wnt-3A條件培養(yǎng)基的最好來源。由于這種條件培養(yǎng)基還包含Wnt-3A蛋白外的其他因子，對于涉及Wnt-3A條件培養(yǎng)基的實驗有必要用其來源細胞株作對照。

生物安全等級 1

生長培養(yǎng)基 DMEM＋0.4mg/ml G418＋10% FBS＋1% P/S

推薦傳代比例 1:3-1:4

推薦換液頻率 2~3次/周

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

基因表達情況 Wnt-3A

細胞培養(yǎng)操作：

1) 復(fù)蘇細胞：以下細胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。

將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤? cm皿中，加入約4 mL培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第三天換液并檢查細胞密度。

2) 細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.02% EDTA）于培養(yǎng)瓶中，使消化液浸潤所有細胞，將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1 -3min（視細胞消化情況而定），然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。

c、將細胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

3) 細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例；

a、收集細胞及細胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進行細胞計數(shù)。

b、根據(jù)細胞數(shù)量加入無血清細胞凍存液，使細胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細胞懸液，注意凍存管做好標識。

c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

公司正在出售的產(chǎn)品：

豚鼠白介素1β(IL1B)檢測試劑盒 ，英文名： IL1B ELISA Kit

Human ubiquitin conjugating enzyme (E2/UBCE) ELISA Kit 人泛素結(jié)合酶(E2/UBCE)檢測試劑盒

rabbitIerleukin6,IL-6ELISAKit 兔子白介素6(IL-6)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforBeta-CG(HumanChorionicGonadoophinBeta)ELISAKit人絨毛膜β

細菌乙醇脫氫酶總活性(NDMA)比色法定量檢測試劑盒20次

rabbitfollicle-stimulatinghormone,FSHELISAKit兔子促卵泡素(FSH)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

SCGB1A1重組小鼠 Uteroglobin / SCGB1A1 蛋白 Protein

Enah/Vasp樣蛋白(EVL)重組蛋白 Recombinant Enah/Vasp Like Protein (EVL)

MAG重組人 MAG / GMA / Siglec-4 蛋白 (Fc 標簽) Protein

IL5RA Protein Human 重組人 IL5Ra / CD125 蛋白

GFRA1 Protein Rat 重組大鼠 GFRA1 / GFR alpha-1 蛋白

Enah/Vasp樣蛋白(EVL)重組蛋白 Recombinant Enah/Vasp Like Protein (EVL)

IL5RA Protein Human 重組人 IL5Ra / CD125 蛋白

SCGB1A1重組小鼠 Uteroglobin / SCGB1A1 蛋白 Protein

GFRA1 Protein Rat 重組大鼠 GFRA1 / GFR alpha-1 蛋白

MAG重組人 MAG / GMA / Siglec-4 蛋白 (Fc 標簽) Protein

L Wnt-3A (小鼠皮下結(jié)締組織細胞)豚鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)檢測試劑盒 ，英文名： iFABP ELISA Kit

Human multidrug resistance associated protein (MRP) ELISA Kit 人多藥耐藥相關(guān)蛋白(MRP)檢測試劑盒

rabbitsolubleP-selectin,sP-selectinELISAKit 兔子可溶性P選擇素(sP-selectin)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforBetaGD(HumanBeta-glucuronidase)ELISAKit人β葡萄糖酸苷酶

細菌腺苷酸激酶(Adenylatekinase)活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒20次

rabbithepatocytegrowthfactor,HGFELISAKit兔子肝細胞生長因子(HGF)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

人脂0壁酸檢測試劑盒   人脂0壁酸試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   人脂0壁酸試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：檢測試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：人脂0壁酸試劑盒、人脂0壁酸檢測試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

人脂聯(lián)素檢測試劑盒   人脂聯(lián)素試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   人脂聯(lián)素試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：檢測試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：人脂聯(lián)素試劑盒、人脂聯(lián)素檢測試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

人脂肪細胞型脂肪酸結(jié)合蛋白檢測試劑盒   人脂肪細胞型脂肪酸結(jié)合蛋白試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   人脂肪細胞型脂肪酸結(jié)合蛋白試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：檢測試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：人脂肪細胞型脂肪酸結(jié)合蛋白試劑盒、人脂肪細胞型脂肪酸結(jié)合蛋白檢測試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

人脂肪酸結(jié)合蛋白檢測試劑盒   人脂肪酸結(jié)合蛋白試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   人脂肪酸結(jié)合蛋白試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：檢測試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：人脂肪酸結(jié)合蛋白試劑盒、人脂肪酸結(jié)合蛋白檢測試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

細胞培養(yǎng)注意事項 ：

一、 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

二、仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細胞因子等，確保細胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細胞出現(xiàn)問題，責任由 客戶自行承擔。

三、用 75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分細胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正?，F(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。

四、貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，，用新鮮的培養(yǎng)基重懸 細胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

五、 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。

六、 建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細胞 的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

七、該細胞僅供科研使用。

八、備注：運輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培 養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。     收到細胞后第一次傳代建議 1：2 傳代 。

九、 注意：  1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。