Psi2 DAP (小鼠胚胎成纖維細(xì)胞)

商品屬性

商品介紹

別稱 Psi2-DAP; Psi-2-DAP; Psi-2 DAP

種屬 小鼠

年齡（性別） 胎兒

組織來(lái)源 正常胚胎

生長(zhǎng)特性 貼壁細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

背景描述：Psi2 DAP細(xì)胞生成一種可以感染小鼠細(xì)胞的載體。Psi2 DAP細(xì)胞生成的載體編碼了人類胎盤堿性磷酸酯酶基因和抗性基因，Psi2 DAP細(xì)胞通過Psi2細(xì)胞插入一個(gè)重組的逆轉(zhuǎn)錄病毒(DAP)基因組衍生而來(lái)。被這種Psi2 DAP細(xì)胞產(chǎn)生的載體感染的細(xì)胞表達(dá)的磷酸酯酶可用組織化學(xué)方法檢測(cè)，可以用作體內(nèi)追蹤它們命運(yùn)的標(biāo)記；Psi2 DAP細(xì)胞也可能產(chǎn)生輔助病毒。

生物安全等級(jí) 1

生長(zhǎng)培養(yǎng)基 DMEM＋10% FBS＋1% P/S

推薦傳代比例 1:3-1:4

推薦換液頻率 2~3次/周

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

基因表達(dá)情況 a human placental alkaline phosphatase transducing vector

細(xì)胞處理：

1） 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況和細(xì)胞密度。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。

2. 加入0.25％（w / v）-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長(zhǎng)消化時(shí)間），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來(lái)終止消化。

3.輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長(zhǎng)活力，后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。

3）細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時(shí)凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：

（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度達(dá)到90%時(shí)，進(jìn)行傳代。

（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。

（3）加入覆蓋瓶底量的且含有EDTA。

（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無(wú)超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，加入2倍量的中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。

（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。

（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。

（9）細(xì)胞凍存

公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠熱休克轉(zhuǎn)錄因子1(HSF1)檢測(cè)試劑盒 ，英文名： HSF1 ELISA Kit

Mouse vascular endothelial cell growth factor C (VEGF-C) ELISA Kit 小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子C(VEGF-C)檢測(cè)試劑盒

RatAquaporin3,AQP-3ELISAKit 大鼠水通道蛋白3(AQP-3)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforGuineapigierleukin4,IL-4ELISAKit豚鼠白介素4

細(xì)胞長(zhǎng)鏈脂酰脫氫酶(ACYLCOADEHYDROGENASE)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

Rattyrosinekinasewithimmunoglobulin-likeandEGF-likedomains2,Tie-2ELISAKit大鼠含免疫球蛋白樣環(huán)和上皮生長(zhǎng)因子樣域酪激酶2(Tie-2)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

CA10重組人 Carbonic Anhydrase X / CA10 蛋白 Protein

顆粒酶H(GZMH)重組蛋白 Recombinant Granzyme H (GZMH)

VTI1A重組人 VTI1A 蛋白 Protein

CLEC4D Protein Human 重組人 CLEC4D / CLECSF8 蛋白

HA Protein H1N1 重組甲型流感 H1N1 (A/USSR/90/1977) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白

顆粒酶H(GZMH)重組蛋白 Recombinant Granzyme H (GZMH)

CLEC4D Protein Human 重組人 CLEC4D / CLECSF8 蛋白

CA10重組人 Carbonic Anhydrase X / CA10 蛋白 Protein

HA Protein H1N1 重組甲型流感 H1N1 (A/USSR/90/1977) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白

VTI1A重組人 VTI1A 蛋白 Protein

Psi2 DAP (小鼠胚胎成纖維細(xì)胞)小鼠水通道蛋白0(AQP-0)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat maix metalloproteinase 2/ gelatinase A (MMP-2/Gelatinase A) ELISA Kit 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/Gelatinase A)檢測(cè)試劑盒

HumanNeuronalChemorepelleSlit2ELISAKit 人神經(jīng)生長(zhǎng)導(dǎo)向因子Slit2檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

DuckIerleukin2,IL-2檢測(cè)試劑盒鴨白介素2(IL-2)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

棗椰樹(datepalm)培養(yǎng)基500毫升溶液/片劑

MouseDehydroepiandrosterone,DHEAELISAKit小鼠脫氫表雄同(DHEA)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)素4(mouse -4)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

小鼠(mouse NO)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

小鼠骨保護(hù)素(mouse OPG)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

小鼠骨橋素(mouse OPN)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

細(xì)胞接收后的處理：

1）收到細(xì)胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請(qǐng)拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。

2）請(qǐng)?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。

3）貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)和貼壁情況，有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過程中會(huì)因振動(dòng)脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)70%-80%以上，可以對(duì)細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中，若因運(yùn)輸振動(dòng)脫落的細(xì)胞需要離心回收。