產(chǎn)品展示
C6 (大鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞)
商品屬性
鑒定 | STR鑒定正確 | 種屬 | 大鼠 |
生長特性 | 貼壁 | 細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 分類 | 大鼠細(xì)胞系 |
商品介紹
別稱 C-6; C 6; RGC-6; RGC6; RGc6
種屬 大鼠
年齡(性別) 不詳
組織來源 膠質(zhì)瘤,腦,膠質(zhì)細(xì)胞
生長特性 貼壁細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
參考資料(來源文獻(xiàn))
膠質(zhì)細(xì)胞株C6是由Benda等用N-亞硝基甲脲誘導(dǎo)的大鼠膠質(zhì)瘤克隆,并經(jīng)過一系列的體外培養(yǎng)和動(dòng)物傳代交替后建成的。C6細(xì)胞表達(dá)S-100;產(chǎn)生生長激素;糖皮質(zhì)激素作用下可以產(chǎn)生磷酸甘油脫氫酶。當(dāng)C6細(xì)胞從低密度生長到滿瓶時(shí),S-100產(chǎn)量增加10倍。 |
生物安全等級(jí) 1
生長培養(yǎng)基 Ham's F-12K+15% HS+2.5% FBS+1% P/S
推薦傳代比例 1:2-1:4
推薦換液頻率 2~3次/周
倍增時(shí)間 ~25-30小時(shí)
凍存條件
凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
溫度:液氮
培養(yǎng)條件
氣相:空氣,95%;CO2,5%
溫度:37℃
受體表達(dá)情況 glucocorticoid receptor
基因表達(dá)情況 S-100 protein; produce glyceryl phosphate dehydrogenase in response to glucocorticoids; somatotrophin
細(xì)胞處理:
1) 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇:
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶(或皿)中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況和細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加入0.25%(w / v)-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘(難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長消化時(shí)間),然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。
3.輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長活力,后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。
3)細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時(shí)凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。
細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟:
(1)當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長密度達(dá)到90%時(shí),進(jìn)行傳代。
(2)吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次,搖勻后棄掉。
(3)加入覆蓋瓶底量的且含有EDTA。
(4)培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化,3min左右拿出,用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量,發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落,加入2倍量的中止消化,并吹打均勻,避免消化過度。
(5)細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi),1000rpm/min離心3~5min。
(6)吸棄上清,加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞,吹打細(xì)胞使其均勻分散。
(7)吸棄細(xì)胞懸液,選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻,放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
(8)根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。
(9)細(xì)胞凍存
公司正在出售的產(chǎn)品:
大鼠激活素A(Activin A)檢測試劑盒 ,英文名: Activin A ELISA Kit
Mouse Ureaplasma urealyticum aibody (UU-Ab) ELISA Kit 小鼠解脲脲原體抗體(UU-Ab)檢測試劑盒
MouseCollagenaseIELISAKit 小鼠膠原酶I(CollagenaseI)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumanPancreaticcarcinomamarkers-CA242ELISAKit人胰腺癌標(biāo)志物CA242
同位素標(biāo)記放射活性濾膜法檢測試劑盒20次
ELISAKitP-PKC大鼠0酸化蛋白激酶C
CLEC10A重組小鼠 CLEC10A / MGL1 / CD301 蛋白 Protein
S100鈣結(jié)合蛋白A12(S100A12)重組蛋白 Recombinant S100 Calcium Binding Protein A12 (S100A12)
CALR重組人 CALR / Calreticulin 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
CLIC4 Protein Human 重組人 CLIC4 蛋白
CD1E & B2M Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD1E & B2M Heterodimer 蛋白
S100鈣結(jié)合蛋白A12(S100A12)重組蛋白 Recombinant S100 Calcium Binding Protein A12 (S100A12)
CLIC4 Protein Human 重組人 CLIC4 蛋白
CLEC10A重組小鼠 CLEC10A / MGL1 / CD301 蛋白 Protein
CD1E & B2M Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD1E & B2M Heterodimer 蛋白
CALR重組人 CALR / Calreticulin 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
C6 (大鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞)小鼠鼠白細(xì)胞分化抗原44(CD44)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human ataxia telangiectasia mated (ATM) ELISA Kit 人毛細(xì)血管擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)突變基因(ATM)檢測試劑盒
Humanai-lymphocyteglobulin,ALGELISAKit 人抗淋巴細(xì)胞球蛋白(ALG)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
E檢測試劑盒魚雌激素規(guī)格:96T/48T
增強(qiáng)型HRP-AEC底物顯色試劑盒10次
MouseCyclin-D3ELISAKit小鼠細(xì)胞周期素D3(Cyclin-D3)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠少突膠質(zhì)細(xì)胞髓鞘糖蛋白抗體(OMgp-Ab)ELISAKit ELISA. 96T/48T
大鼠核因子κB抑制蛋白α(IKBα)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠抗核抗體(ANA)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠鑰孔蟲戚血藍(lán)蛋白(KLH)ELISAKit ELISA. 96T/48T
細(xì)胞接收后的處理:
1)收到細(xì)胞后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染,請(qǐng)拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。
2)請(qǐng)?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài),同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。
3)貼壁細(xì)胞:細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長和貼壁情況,有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過程中會(huì)因振動(dòng)脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長密度若在60%以下,可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基(若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收,重懸打入到原培養(yǎng)瓶中),加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL,放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長密度達(dá)70%-80%以上,可以對(duì)細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中,若因運(yùn)輸振動(dòng)脫落的細(xì)胞需要離心回收。